Aldatutako peptidoen disolbagarritasunari buruzko galdera eta erantzun batzuk

1. Zer ezpurutasun daude HPLC ez direnak arauetan?

A: Aldatutako peptidoaren eta aldatutako peptidoaren ezpurutasunak aldatutako peptido gordin eta desaltatuan: esaterako, luzera ez den peptido aldatua eta DTT, TFA, etab.

2. Zer ezpurutasun arazten dira HPLC-k?

A: HPLC-k araztutako peptido aldatuak oraindik ere ezpurutasun ugari izango ditu, eta ezpurutasunak normalean peptido motzak eta TFA apur bat dira.

3. Zenbat denbora da egokia?

A: Aldatutako peptidoaren sintesiak aldatutako peptidoaren, kargu, hidrofilikotasunaren eta hidrofobilitatearen eta beste faktore batzuen luzera kontuan hartu behar du. Luzera zenbat eta luzeagoa izan, orduan eta txikiagoa izan da produktu gordinaren garbitasuna eta errendimendua, eta orduan eta handiagoa da arazketa zailtasuna eta sintesian zailtasunak izateko probabilitatea. Hala ere, ez dago aldatutako peptidoaren domeinu funtzionalaren sekuentzia aldatzeko modurik. Aldatutako peptidoaren sintesia burutzeko, batzuetan aminoazido laguntzaile batzuk soilik gehitu daitezke domeinu funtzionalaren gorabehera eta beheranzkoan, aldatutako peptidoaren disolbagarritasuna eta hidrofobizitatea hobetzeko. Aldatutako peptidoa laburregia bada, baliteke sintesian arazoak izatea. Lehenengo arazoa zera da: sintetizatu gabeko peptidoak zenbait zailtasun dituela prozesatzeko prozesuan. 5 peptidoen barruan aldatutako peptidoak normalean aminoazido hidrofoboak ditu, bestela, post-prozesamendua zaila da. 15 aminoazidoen hondakinen azpitik dauden peptidoak, oro har, errendimendu eta errendimendu egokiarekin lor daitezke.

Aldatutako peptidoen disolbagarritasunari buruzko galdera eta erantzun batzuk

4. Nola epaitu aldatutako peptidoaren disolbagarritasuna sekuentziatik?

(1) Aminoazido hidrofobikoen proportzioaren proportzio aldatua, Leu, Val, Iie, ezagutu, PHE eta TRP, ez da erraz disolbagarria disoluzio akusoan edo ia disolbaezinetan. Aminoazido hau arazketa edo sintesian arazorik izan daiteke.

(2) the proportion of hydrophobic amino acids under normal conditions < The proportion of charged amino acids can reach up to 20%. If the N or C of the modified peptide is short, the increase of polar amino acids can also improve the solubility.

5. Zergatik da zaila Cys, ezagutu edo Trp sintetizatzea?

A: CYS, MET edo TRP dituzten peptido aldatuak ezin dira sintetizatu eta garbitasun handiko produktuak lortzeko zailak dira. Hau da, batez ere, talde horiek egonkorrak eta oxidaziorako joera izateagatik. Aldatutako peptido horiek erabiltzeak eta biltegiratzeak arreta berezia behar du tapa irekitzea saihesteko.

6, zergatik izango da etekin sintetiko edo garbitasun batzuk oso baxuak?

A: Alde handia dago aldatutako peptidoen sintesiaren eta primeren sintesiaren artean. Oso sintetizatu ezin diren primer gutxi daude, baina sintetizatu ezin diren peptidoak aldatzen dira maiz. Hala nola Val, Ile, Tyr eta Trp, Leu, Phe, GLN, eta Thrino azidoa gertu edo begizta, eta ez dira biezta aldatutako peptido aldatuak tartekatu sintesia prozesuan, eraginkortasun sintetikoa txikiagoa da. Sintesiaren eraginkortasuna eta produktuaren garbitasuna oso baxua dira ondorengo kasuetan, hala nola: errepikatu pro, ser-ser, errepikatu ASP, lau jarraian, etab.

7. Nola arazten da?

A: Aldatutako peptidoak, oro har, alderantzizko faseko zutabearen arabera arazten dira (adibidez C8, C18, etab.) 214nm-tan. Buffer Sistema, oro har, TFA, Ph2.0 daukan irtenbidea da. Bufferak% 0,1 tfainddh2o izan zuen, eta Buffertek% 1 TFA / ACN / PH2.0. Bufferan desegin zen arazketa aurretik; Irtenbidea ona ez bada, desegin bufferrarekin, eta ondoren bufferarekin diluitu; Aldatutako peptido hidrofoboentzat, batzuetan, formisatu edo azido azetiko apur bat gehitzen da.