Phosforylation aldaketak funtsezko eginkizuna du zelulen bizitzan eta hainbat alderdi eragiten ditu. Proteinen fosforilazioa oso lotuta dago hainbat prozesu biologikoekin, hala nola DNA kalteak konpontzeko, transkripzioaren erregulazioa, seinale transdukzioa eta zelula apoptosiaren erregulazioa. Phosforilatutako proteinak eta peptidoak aztertzeak prozesu horien mekanismoak agerian uzten ditu eta bizitzako jardueren funtsa ulertzen du. Hong Peptide Bioteknologiak fosforiko helduen peptidoaren etiketatze teknologia du. Bere abantaila teknologikoak eta lehengaiak aprobetxatuz, fosforilatutako serine (PSER), fosforilatutako threonine (pthylylated threonine (Ptyr) duten peptiloak sintetizatu ditzakegu, eta fosforiko tirosina (fosforazio-guneetako bat eta kalitate handiko peptidoak eman.
Fosforilazioaren markaketa teknologiaren ikuspegi orokorra:
Phosforylated peptidoek batez ere serinearen (ser), tirosina (tyr), thrreonine (thr) alboko kateak aipatzen dituzte fosfato azido azidoetan. Peptido fosforikoek funtsezko eginkizuna dute proteina fosforilazioaren azterketan. Hori dela eta, bereziki garrantzitsua da proteinen eta peptidoen erreakzio fosforikoen erreakzioak sakontzea eta metodo sintetiko helduak eta sintetikoak aurkitzea.
Gaur egun, fosforilazioaren peptidoak aldatzeko metodoak bi kategoriatan sartzen dira batez ere:
(1) zuzenean babestutako fosforikoen aminoazidoak peptidoaren sekuentzian txertatzea:
Lehenik eta behin, fosforilatuak izan behar duten aminoazidoak fosforilazio tratamendua eta behar bezala babestuta daude. Ondoren, ohiko fase peptidoaren sintesia (SPPS) prozesua jarraituz, monomero fosforikoak Polypeptide-ko gune jakin batzuekin lotuta daude. Metodo hau erraza da funtzionatzeko eta peptidoen fosforologiaren aldaketarako teknika nagusietako bat bihurtu da.
(2) Erretxinaren gainean polipeptido sekuentzia sintetizatu ondoren, ser, tyr edo th-ko alboko kate hidroxil taldeak fosforilatuak dira:
Fosforilazioaren aldaketa egitean, fosforoen monomeroak polipepturan zuzenean kondentsatzeko metodoa onartzen bada, aminoazido fosforilatuak, alboko kate handiagoaren ondorioz, oztopo esterikoaren hazkundea eragiten du, kondentsazioa peptido katearekin kondentsazioa areagotuz. Gainera, ondorengo aminoazidoak sartzea nahiko konplexua bihurtuko da, batez ere fosforilazio gune ugari daudenean. Sintesi prozesua oso zaila izango da, eta azken produktua oso konplexua izango da, bereizketa zaila da eta errendimendua oso baxua da. Hori dela eta, Phosforylation behar duten gune anitz daudenean, polipeptidoaren katearen fosforikoa behar dutenean, lehenik eta behin, erretxinaren sekuentziaren sekuentziaren sintesia osatzea izan daiteke eta, ondoren, fosforilatoa ser, tyr edo th-ren alboko kateak. Prozesu horretan, lehenik eta behin, kendu itzazu alboko katea aminoazidoaren taldeak babesteko etiketatu beharreko. Tyr eta Threntzat, bertako kateen babesik gabeko aminoazidoek zuzenean erreakziona dezakete. Alboko kateak babesteko taldeak kuantitatiboki kendu daitezke% 1 TFA / DCM egoeraren arabera. Metodo honetan, Bis-Benzyl fosforamidatearen eta tetrazolaren bitarteko aktiboa bigarrenarekin erreakzioaren bidez sor daiteke, eta hidroxil taldearekin lotuta egon daiteke. Ondoren, peroxido azidoen baldintzetan oxidazio erreakzioa egin daiteke fosfoi-taldea sortzeko, fosforilazioa osatuz.
Ordua: 2025-07-16