Bizitza prozesuetan paper garrantzitsua betetzen du, Tyrr, Ser, Thr fosforilatuz, peptidoetan kokatuta.Aminoazido fosforilatua normalean azido fosforikoaren peptidoa ekoizteko erabiltzen da, gaur egun fenil fosforilatutako aminoazido bakarrean erabiltzen dena.HBTU/aminoazido fosforilatuak normalean HOBt/DIEA metodoa aminoazido fosforilatuak konektatzeko erabiltzen dira, baina azido fosforikoko peptidoek ikuspegi hau akatsak aukeratzen dituzte, batez ere sortutako peptido peptido askoz luzeagoetan edo aminoazido fosfatoetan, eraginkortasuna baxua, baxua da konektatzeko. azken produktuaren purutasuna.Fosfopeptido honetarako, fosforilazio osteko ikuspegi selektiboa hartu dugu kontuan.Sortze-prozesua peptidoen sintesiaren ondoren etiketatu behar diren aminoazidoen albo-katearen babes-taldeak selektiboa kentzea da.Tyrrentzat, Thr-ek zuzenean erreakziona dezake babesik gabeko albo-kateak dituzten aminoazidoak erabiliz.-Ser (trt), kuantitatiboki kenduta %1 TFA /DCM ingurunean.
Fosforilazioa, bentzeno fosfito fosforamido bikoitzarekin eta lau nitrogenoarekin sortzen dira eta fosforamida tetrazolio bitartekari aktiboak, hidroxiarekin konektatuta, ondoren azido peroxidoaren oxidazio fosforiloaren eraketa, erreakzio osoa.
Gaur egun, peptido fosforilatuaren aldaketa metodoa bi mota nagusi daude:
(1) neurriz bermatutako aminoazido fosforilatuak zuzenean sartzea polipeptido-sekuentzian;
(2) sekuentzia peptidikoan sortutako erretxinaren ondoren, albo-katearen hidroxiloaren Ser, Tyr edo Thr fosforilaziora.
1) aminoazido fosforilatutako berme moderatuak zuzenean sartuko ditu peptido-sekuentzia:
Hau da, fosforilatu behar diren aminoazidoak aldez aurretik fosforilatuko dira eta behar bezala babestuta egongo dira (Thr,Ser edo Tyr), eta gero fosforilazioa polipeptido indizearen hautaketa puntura murriztuko da SPPS sorkuntza prozesu arruntean oinarrituta. .Metodo hau funtzionatzeko erraza da, peptidoen enpresen aldaketa fosforilatuaren metodo nagusia bihurtu da.
2) Sekuentzia peptidikoan sortutako erretxinaren ondoren, Ser hidroxi fosforilaziora, Tyr edo Thr alboko kateetara:
Fosforilazio-apainketa polipeptidoen metodoan uzkurdura bakar baten fosforilazioa erabiliz, alboko katearen dekorazioan talde handiek sortzen duten oztopo esterikoaren ondorioz, zaila da aminoazidoen fosforilazioa kate peptidikoarekin uzkurtzea.Etorkizunean, aminoazidoak sartzea zailagoa izango da, batez ere fosforilazio gune anitz dituen dekorazioan, sorrera oso zaila izango da, azken produktuaren konposizioa konplexua da, zaila da bereiztea eta etekina oso baxua da.
Hori dela eta, kate peptidikoaren hainbat gune fosforilatzen direnean, erretxinan peptido-sekuentzia sortzea aukeratu daiteke eta gero Ser, Tyr edo Thr-en albo-katearen hidroxilo-taldearen bidez fosforilatzea: bere sorrerak, batez ere, sekuentzia selektiboa kentzea dakar. Peptidoen sintesiaren ondoren aminoazidoak ezagutzea eskatzen duen albo-katearen babes taldea.Tyr-entzat, Thr-ek zuzenean erabil ditzake aminoazidoen albo-kateak babestuta ez dauden erantzunetan.
Alboko katearen babeserako oinarria % 1 TFA/DCM ingurunea kuantitatiboki kendu daiteke.Metodo hau aukeratzen denean, fosforamidita-tetrazolio-bitarteko aktibo bat sor daiteke dibenzil fosforamidita eta tetrazolioa erabiliz, hidroxilo-talde bati lotuta, eta, ondoren, fosforil-talde bat osatzeko, ingurune peroxiazidoan erreakzioa osatzeko.
Argitalpenaren ordua: 2023-08-09