HPLC hutsegite eta soluzioetarako joera gehien duena

Zehaztasun handiko tresna gisa, HPLC-k arazo txiki eta arazo batzuk erraz sor ditzake erabileran zehar modu egokian funtzionatzen ez badu.Arazo ohikoenetako bat zutabeen konpresioaren arazoa da.Nola azkar konpondu kromatografo akastuna.HPLC sistema, batez ere, gordailu botila bat, ponpa bat, injektore bat, zutabe bat, zutabe tenperatura-ganbera, detektagailu bat eta datuak prozesatzeko sistema osatzen dute.Sistema osorako, zutabeak, ponpak eta detektagailuak dira funtsezko osagaiak eta arazoak izateko joera duten kokapen nagusiak.

Zutabeen presioaren gakoa HPLC erabiltzean arreta handia behar duen eremua da.Zutabearen presioaren egonkortasuna gailur kromatografikoaren formarekin, zutabeen eraginkortasunarekin, bereizketa eraginkortasunarekin eta atxikipen denborarekin oso lotuta dago.Zutabearen presioaren egonkortasunak ez du esan nahi presioaren balioa balio egonkor batean egonkorra denik, baizik eta presio-fluktuazio-tartea 345kPa edo 50PSI artekoa dela (gradiente eluzioa erabiltzeko aukera ematen du zutabearen presioa egonkorra eta poliki-poliki aldatzen denean).Presio altuegia edo baxuegia zutabeen presioaren arazoa da.

HPLC hutsegite eta soluzioetarako joera gehien duena

1, presio altua da HPLC erabileran arazo ohikoena.Horrek presio bat-bateko igoera esan nahi du.Oro har, arrazoi hauek daude: (1) Oro har, fluxu-kanalen blokeoagatik gertatzen da.Une honetan, zatika aztertu beharko genuke.a.Lehenik eta behin, moztu huts-ponparen sarrera.Une honetan, PEEK hodia likidoz bete zen, PEEK hodia disolbatzaile botila baino txikiagoa izan zedin, likidoa nahierara isurtzen ote zen ikusteko.Likidoa tantaka edo astiro tantaka ez bada, disolbatzaile-iragazkiaren burua blokeatuta dago.Tratamendua: % 30eko azido nitrikoan busti ordu erdiz eta garbitu ur ultrapuruarekin.Likidoa ausaz isurtzen bada, disolbatzaileen iragazki-burua normala da eta egiaztatzen ari da;b.Ireki Purge balbula, fase mugikorra zutabetik igaro ez dadin, eta presioa nabarmen murrizten ez bada, iragazki buru zuria blokeatu egiten da.Tratamendua: iragazitako zuriak kendu eta %10eko isopropanolarekin sonikatu ziren ordu erdiz.Presioa 100PSItik behera jaisten dela suposatuz, iragazitako buru zuria normala da eta egiaztatzen ari da;c.Kendu zutabearen irteera-muturra, presioa jaisten ez bada, zutabea blokeatuta dago.Tratamendua: Buffer gatz blokeoa bada, garbitu % 95 presioa normala izan arte.Oztopoa kontserbatuago dagoen material batek eragiten badu, egungo fase mugikorra baino fluxu indartsuagoa erabili behar da presio arruntera azkar joateko.Epe luzerako garbiketa-presioa aurreko metodoaren arabera murrizten ez bada, zutabearen sarrera eta irteera tresnari konektatu direla kontsidera daiteke, aitzitik, eta zutabea fase mugikorrekin garbitu daiteke.Une honetan, zutabearen presioa oraindik murrizten ez bada, zutabe sarrerako bahe-plaka bakarrik ordeztu daiteke, baina funtzionamendua ona ez denean, erraza da zutabearen efektua murriztea, beraz, saiatu gutxiago erabiltzen.Arazo zailetarako, zutabeen ordezkapena kontuan hartu daiteke.

(2) Emari-abiaduraren ezarpen okerra: emaria-abiadura zuzena berrezarri daiteke.

(3) Fluxu-erlazio okerra: fluxuen proportzio desberdinen biskositate-indizea desberdina da, eta biskositate handiagoa duen fluxuari dagokion sistemaren presioa ere handiagoa da.Ahal izanez gero, biskositate baxuagoko disolbatzaileak ordezkatu edo berriro ezarri eta prestatu daitezke.

(4) Sistemaren presioa zero noraeza: egokitu likido-mailaren sentsorearen zeroa.

2, presioa baxuegia da (1) sistemaren ihesak eragiten du normalean.Zer egin: Aurkitu konexio bakoitza, batez ere zutabearen bi muturretako interfazea, eta estutu ihes-eremua.Kendu zutaina eta estutu edo forratu PTFE filma indar egokiarekin.

(2) Gasa ponpan sartzen da, baina une honetan presioa ezegonkorra izan ohi da, altua eta baxua.Larriago, ponpak ezin izango du fluidoa xurgatu.Tratamendu metodoa: ireki garbiketa balbula eta garbitu 3 ~ 5 ml/min-ko emariarekin.Hala ez bada, aire-burbuilak ihes-balbulan aspiratu ziren orratz-hodi berezi bat erabiliz.

(3) Fase mugikorreko irteerarik ez: egiaztatu urtegi-botilan fase mugikorrik dagoen, konketa fase mugikorrean murgilduta dagoen eta ponpa martxan dagoen.

(4) Erreferentzia-balbula ez dago itxita: erreferentzia-balbula itxi egiten da dezelerazio ondoren.Normalean 0,1era jaisten da.~ 0,2 ml/ min erreferentzia-balbula itxi ondoren.

Laburpen:

Artikulu honetan, kromatografia likidoaren ohiko arazoak baino ez dira aztertzen.Noski, gure aplikazio praktikoan, beste arazo gehiago topatuko ditugu.Akatsen tratamenduan, printzipio hauek jarraitu beharko genituzke: faktore bat bakarrik aldatzea faktore hipotetikoaren eta arazoaren arteko erlazioa zehazteko;Orokorrean, arazoak konpontzeko piezak ordeztean, arreta jarri beharko genioke desmuntatutako piezak berriro lekuan jartzean hondakinak saihesteko;Erregistro-ohitura ona eratzea da matxurak kudeatzeko arrakastaren gakoa.Ondorioz, HPLC erabiltzean, garrantzitsua da laginaren aurretratamenduari eta ekipoen funtzionamendu eta mantentze egokiari arreta jartzea.