Zehaztasun handiko instrumentu gisa, HPLCk arazo txikiak ekar ditzake arazo txikiak erabiltzeko modu egokian funtzionatzen ez badu. Arazo ohikoenetako bat zutabe konpresioaren arazoa da. Nola azkar konpontzen da kromatografo akastuna. HPLC sistema batez ere urtegiko botila, ponpa, injektore bat, zutabe bat, zutabe-tenperatura ganbera, detektagailu bat eta datuen tratamendu sistema osatzen dute. Sistema osorako, zutabeak, ponpak eta detektagailuak dira funtsezko osagaiak eta arazoetarako joera duten kokapen nagusiak.
Zutabeen presioaren gakoa HPLC erabiltzen denean arreta handia behar duen eremua da. Zutabeen presioaren egonkortasuna oso lotuta dago gailur kromatografikoarekin, zutabeen eraginkortasunarekin, bereizketa eraginkortasunarekin eta atxikipen-denborarekin. Zutabeen presioaren egonkortasunak ez du esan nahi presioaren balioa balio egonkorrean egonkorra denik, baizik eta presioaren gorabehera-tartea 345kpa edo 50ps artean (zutabearen presioa egonkorra eta poliki aldatzen denean kontzentratzen da). Presio oso altua edo gehiegi zutabeen presioaren arazoa da.
HPLC porrot eta irtenbideetara joatekoena
1, presio handia da HPLCren erabileran arazo ohikoena. Horrek presioaren bat-bateko igoera esan nahi du. Oro har, badira arrazoi hauek: (1) orokorrean, fluxu kanalaren blokeoa dela eta. Puntu honetan, pieza aztertu beharko genuke. a. Lehenik eta behin, moztu hutsezko ponparen sarrera. Puntu honetan, begiradako hodi likidoz bete zen, begiradak disolbatzaile botila baino txikiagoa izan zedin, likidoa borondatez tantaka ari zen ikusteko. Likidoa poliki-poliki botatzen ez bada, disolbatzaile iragazkiaren burua blokeatuta badago. Tratamendua: busti% 30 azido nitriko ordu erdi eta garbitu ur ultrapurearekin. Likidoak ausaz jotzen badu, disolbatzaile iragazkiaren burua normala da eta egiaztatzen ari da; b. Ireki garbitzeko balbula, fase mugikorra zutabetik pasatu ez dadin, eta presioa nabarmen murrizten ez bada, iragazkiaren buru zuria blokeatuta dago. Tratamendua: iragazitako zuriak kendu egin ziren eta% 10eko isopropanolarekin sonikatu ziren ordu erdi batez. Presioa 100psi azpitik jaisten dela suposatuz, iragazitako buru zuria normala da eta egiaztatzen ari da; c. Kendu zutabearen irteera muturra, presioa gutxitzen ez bada, zutabea blokeatuta dago. Tratamendua: gatz gatz blokeoa bada, garbitu% 95 presioa normala den arte. Oztopoa oso kontserbatutako material batzuengatik sortzen bada, fase mugikorra baino fluxu sendoagoa erabili behar da presio normalera joateko. Epe luzerako garbiketa-presioa ez bada goiko metodoaren arabera gutxitzen, zutabearen sarrerak eta irteera kontrakoa konektatu daitekeela uste da, eta zutabea fase mugikorrarekin garbitu daiteke. Une honetan, zutabearen presioa oraindik murrizten bada, zutabearen sarrerako bahearen plaka bakarra ordezkatu daiteke, baina eragiketa ona ez denean, erraza da zutabearen efektua murriztea, beraz, saiatu gutxiago erabiltzen. Arazo zailak direla eta, zutabeen ordezkapena kontuan hartu daiteke.
(2) Fluxu-tasaren ezarpen okerra: fluxu-tasa zuzena berrezarri daiteke.
(3) Fluxu-erlazio okerra: fluxuen proportzio desberdinen biskositate-indizea desberdina da eta fluxuaren isurketari dagokion sistemaren presioa ere handiagoak dira. Ahal izanez gero, biskositate-disolbatzaile txikiagoak ordezkatu edo berriro ezarri eta prestatu daitezke.
(4) Sistemaren presio zero deriva: doitu likido maila sentsorearen zero.
2, presioa baxua da (1) normalean sistemaren ihesak eragiten du. Zer egin: aurkitu konexio bakoitza, batez ere interfazea zutabearen bi muturretan eta estutu ihes eremua. Kendu postua eta estutu edo lerrokatu PTFE filma indar egokiarekin.
(2) Gasak ponpan sartzen da, baina presioa normalean ezegonkorra da une honetan, altua eta baxua. Serioago, ponpak ezin izango du fluidoa xurgatu. Tratamendu metodoa: garbitu balbula eta garbitu 3 ~ 5ml / min-ko fluxu-tasa. Bestela, aire burbuilak ihes-balbulan aspiratu ziren, orratz-hodia dedikatua erabiliz.
(3) Ez da fase mugikorrik ateratzea: egiaztatu urtegiko botilan fase mugikorrik dagoen ala ez, konketa mugikorrean murgilduta dagoen ala ez, eta ponpa martxan dagoen ala ez.
(4) Erreferentziako balbula ez da itxita: erreferentziako balbula itxita dago. Normalean 0,1era jaisten da. ~ 0,2ml / min erreferentziako balbula itxi ondoren.
Laburpena:
Artikulu honetan, likido kromatografian arazo arruntak aztertzen dira soilik. Jakina, gure aplikazio praktikoan beste arazo gehiago topatuko ditugu. Akatsak manipulatzean, printzipio hauek jarraitu beharko genituzke: faktore bakarra aldatu aldi berean faktore hipotetikoaren eta arazoaren arteko erlazioa zehazteko; Orokorrean, arazoak konpontzeko piezak ordezkatzerakoan, arreta jarri beharko genuke hondakinak prebenitzeko neurri desegiteko zatiak jartzeari; Erregistro ona ohitura bat eratzea da akatsen manipulazioaren arrakastaren gakoa. Ondorioz, HPLC erabiltzen duzunean, garrantzitsua da ekipamenduaren tratamendua eta funtzionamendu egokia eta mantentzea arreta jartzea.
Ordua: 02/07-07