Proteina-antigeno birkonbinatzaileek hainbat epitopo desberdin izaten dituzte, horietako batzuk sekuentzia epitopoak eta beste batzuk epitopo estrukturalak.Animaliak antigeno desnaturalizatuekin immunizatuz lortutako antigorputz poliklonalak epitopo indibidualen antigorputzen nahasketak dira eta orokorrean egitura naturalak edo proteina desnaturalizatuak detektatzeko erabil daitezke.Proteina desnaturalizatuak immunogeno gisa erabiltzearen alde onura bat da proteina desnaturalizatuek immunogenoagoak izan ohi direla eta animalien erantzun immune indartsua susper dezaketela.
Escherichia coli-ren adierazpen-sistema helburu antigenikoetarako aukeratzen da normalean, denbora eta diru aldetik sistemarik garestiena delako.Helburu-proteinaren adierazpen-aukera eta arazteko erosotasuna hobetzeko, batzuetan xede-proteinaren zati txiki bat baino ez da adierazten, hala nola domeinu zehatz bat.
Proteinen hiru dimentsioko egitura
Proteina baten domeinu espezifikoa
Antigorputzak prestatzearen helburua wb detektatzeko soilik bada, ekonomikoa eta azkarra da antigeno gisa peptido txiki sintetikoa erabiltzea, baina immunogenikotasun ahula edo ez-regenikotasun arriskua dago peptido-segmentuaren hautaketa desegokiaren ondorioz.Antigorputzak prestatzeak epe luzea eskatzen duenez, sarritan bi edo hiru segmentu peptidiko ezberdin hautatzen dira antigorputzak prestatzeko, antigeno polipeptidikoa erabiliz, esperimentuaren arrakasta-tasa ziurtatzeko.
Immunizaziorako antigeno polipeptidikoaren garbitasuna % 80 baino handiagoa izan behar da.Araztasun handiago batek teorikoki espezifikotasun hobea duten antigorputzak lor ditzakeen arren, praktikan, animaliek beti ekoizten dituzte antigorputz ez-espezifikoak kopuru handi bat, horrela antigenoaren garbitasunaren onurak estaliz.
Gainera, peptido txikietatik abiatutako antigorputzak prestatzea antigeno eramaile egokiarekin gurutzatuta egon behar da bere immunogenizitatea hobetzeko.Bi eramaile antigeniko ohikoak KLH eta BSA dira.
Argitalpenaren ordua: 2023-mar-23