Ikerketa biologikoan, sekuentzia luzea duten polipeptidoak erabili ohi dira.Sekuentzian 60 aminoazido baino gehiago dituzten peptidoetarako, geneen adierazpena eta SDS-PAGE erabiltzen dira orokorrean horiek lortzeko.Hala ere, metodo honek denbora luzea hartzen du eta azken produktua bereizteko efektua ez da ona.
Peptidoen sintesi luzerako erronkak eta irtenbideak
Peptido luzeen sintesian, arazo baten aurrean gaude beti, hau da, kondentsazio-erreakzioaren oztopo esterikoa areagotu egiten da sintesian sekuentzia handitzean, eta erreakzio-denbora egokitu behar da erreakzioa osatu ahal izateko.Hala ere, zenbat eta erreakzio denbora luzeagoa izan, orduan eta albo-ondorio gehiago sortzen dira eta xede-peptidoaren zati bat sortzen da.Horrelako hondakinak: peptido-kate defizitak peptidoen sintesi luzean sortzen diren funtsezko ezpurutasunak dira.Hori dela eta, peptido luzearen sintesian, gainditu behar dugun arazo nagusia kalitate handiko erreakzio-baldintzak eta erreakzio-metodoak aztertzea da, aminoazidoen kondentsazio-erreakzioa zabalagoa eta beteagoa izan dadin.Horrez gain, erreakzio-denbora murriztu, izan ere, zenbat eta luzeagoa izan erreakzio-denbora, orduan eta albo-erreakzio kontrolaezinagoak, orduan eta konplexuagoak dira azpiproduktuak.Beraz, hiru puntu hauek laburbiltzen dira:
Mikrouhinen sintesia erabil daiteke: Integratzeko errazak ez diren sintesi-prozesuan aurkitzen diren aminoazido batzuetarako, mikrouhinen sintesia erabil daiteke.Metodo honek emaitza nabarmenak ditu, eta asko murrizten du erreakzio-denbora, eta funtsezko bi azpiproduktuen eraketa murrizten du.
Fragmentuen sintesi metodoa erabil daiteke: Peptido batzuk sintesi-metodo arrunten bidez sintetizatzen zailak direnean eta arazteko errazak ez direnean, peptidoaren segmentu jakin batean hainbat aminoazidoren kondentsazio osoa har dezakegu peptido-katean bere osotasunean.Metodo honek sintesian ere arazo asko ebatzi ditzake.
Azilhidrazidaren sintesia erabil daiteke: acilhidrazida peptidoen sintesia N-terminaleko Cys peptidoaren eta C-terminaleko polipeptido hidrazidaren erreakzio selektibo kimikoaren fase solidoaren sintesia metodo bat da, amida-loturak eratzeko peptido-lotura metodoa lortzeko.Cys-ek peptido-katean duen posizioan oinarrituta, metodo honek peptido-kate osoa sekuentzia anitzetan banatzen du eta hurrenez hurren sintetizatzen ditu.Azkenik, xede-peptidoa fase likidoko kondentsazio erreakzioaren bidez lortzen da.Metodo honek peptido luzearen sintesi-denbora asko murrizten du, baina azken produktuaren garbitasuna nabarmen handitzen du.
Peptidoen arazketa luzea
Peptido luzeen berezitasunak ezinbestean peptido gordinaren osagai konplexuetara eramaten du.Horregatik, HPLC bidez peptido luzeak garbitzea ere erronka bat da.Polipeptidoen arazketa prozesuko amiloide seriea, esperientzia asko xurgatzen duena eta peptido luzearen arazketan arrakastaz erabilia.Ekipamendu berriak, arazketa sistema anitz nahastuz, behin eta berriz bereizketa eta beste esperientzia metodo batzuk nahastuz, peptido luzeen arazketa arrakasta-tasa asko hobetu zen.
Argitalpenaren ordua: 2023-04-18