Ikerketa biologikoan, sekuentzia luzea duten polipeptoak erabiltzen dira normalean. Sekuentzian 60 aminoazido baino gehiago dituzten peptidoak, gene espresioa eta SDS orria orokorrean erabiltzen dira horiek lortzeko. Hala ere, metodo honek denbora luzea behar du eta azken produktuaren bereizketa efektua ez da ona.
Erronkak eta irtenbideak peptido luzearen sintesia egiteko
Peptido luzeen sintesian, arazo baten aurrean gaude beti, kondentsazio erreakzioaren oztopoaren oztopoen arteko lotura areagotzen da sintesian sekuentzia areagotuz, eta erreakzioaren denbora egokitu behar da erreakzioa osatzeko. Hala ere, zenbat eta erreakzio denbora luzeagoa izan, orduan eta bigarren mailako efektu gehiago sortzen dira, eta xede peptidoaren zati bat eratzen da. Hondakinak - Peptido kateak gabeziak funtsezkoak dira peptido luzearen sintesian sortutakoak. Hori dela eta, peptido luzearen sintesian, gainditu behar dugun arazo nagusia kalitate handiko erreakzioen baldintzak eta erreakzio metodoak esploratzea da, aminoazido kondentsazio erreakzioa integrala eta osoa izan dadin. Gainera, murriztu erreakzioaren denbora, zenbat eta erreakzio-denbora zenbat eta luzeagoa izan, orduan eta kontrolaezinak diren bigarren erreakzioak, azpiproduktu konplexuagoak. Beraz, honako hiru puntu laburbildu dira:
Mikrouhin-sintesia erabil daiteke: Integratuko ez diren sintesi prozesuan topatutako aminoazido batzuetarako, mikrouhin-sintesia erabil daiteke. Metodo honek emaitza nabarmenak ditu eta erreakzioaren denbora asko murrizten du eta bi azpiproduktu gakoen eraketa murrizten du.
Fragment sintesia metodoa erabil daiteke: Peptido batzuk zailak direnean sintetizatutako metodo arruntak sintetizatzen direnean eta ez da erraz arautzen, aminoazidoen kondentsazio osoa peptidoaren segmentu batean peptidoaren katearengana hartzera dezakegu. Metodo honek sintesian arazo ugari ere konpon ditzake.
Acylhydrazido sintesia erabil daiteke: Peptidoen acylhydrazidaren sintesia N-Terminal CYS peptidoaren eta C-Terminal Polypeptide-ren sintesiaren sintesia da. Peptido katearen CYS posizioan oinarrituta, metodo honek kate peptido osoa sekuentzia anitzetan banatzen du eta hurrenez hurren sintetizatzen ditu. Azkenik, xede peptidoa fase likidoen kondentsazio erreakzioaren bidez lortzen da. Metodo honek peptido luzearen sintesia denbora asko murrizten du, baina, gainera, azken produktuaren garbitasuna nabarmen handitzen du.
Pultsio luzeko arazketa
Peptido luzeen berezitasunak ezinbestean, peptido gordinen osagai konplexuetara eramaten ditu. Hori dela eta, erronka da HPLC-k peptido luzeak araztea ere. Polipeptideko arazketa prozesuaren amiloideen seriea, esperientzia asko xurgatuz eta arrakastaz erabili da peptido luzearen arazketan. Ekipamendu berriak hartuz, arazketa sistema anitz nahastuz, errepikatutako bereizketa eta beste esperientzia metodoak nahastuz, peptidoaren arazketa luzeko arrakastaren tasa asko hobetu zen.
Ordua: 03-07-07